做好液相色譜儀的日常維護(hù)保養(yǎng)，養(yǎng)成良好的使用習(xí)慣，能極大地降低故障率，減少停機(jī)和降低維修成本。從液相色譜儀的硬件結(jié)構(gòu)來(lái)看，按照流動(dòng)相經(jīng)過(guò)的順序有以下組成部分:流動(dòng)相→輸液泵→進(jìn)樣器→色譜柱→檢測(cè)器。下面就依照此順序來(lái)探討液相色譜儀各部件、各環(huán)節(jié)在日常使用中需要注意的事項(xiàng)。
流動(dòng)相的保養(yǎng)
1.水相溶液
對(duì)于水相溶液來(lái)說(shuō)，首要的問(wèn)題是防止污染。雖然液相用的水大都經(jīng)過(guò)殺菌處理，但是細(xì)菌的生命力很頑強(qiáng)，在適當(dāng)?shù)臏囟群凸庹涨闆r下，它們就會(huì)活躍起來(lái)，如果在流動(dòng)相里加入磷酸鹽一類的添加劑，它們更是如虎添翼。所以，對(duì)于溶劑瓶我們要做的非常重要的工作就是勤換流動(dòng)相，常換常新。
2.有機(jī)相溶液
對(duì)于有機(jī)相溶液，可以不用擔(dān)心細(xì)菌繁殖的問(wèn)題。但是有機(jī)相容易發(fā)生聚合，特別是乙腈在適宜的光照條件下極易發(fā)生聚合，瓶子里就會(huì)出現(xiàn)一些絮狀的聚合沉淀物。為了防止聚合過(guò)程的發(fā)生，裝乙腈時(shí)要用棕色的溶劑瓶，避免陽(yáng)光直射，更換乙腈時(shí)應(yīng)當(dāng)棄去瓶底剩余的溶液。
3.清洗過(guò)濾
溶劑瓶里的過(guò)濾頭，其作用是為了防止溶液瓶中的顆粒雜質(zhì)進(jìn)入到儀器的流路系統(tǒng)中，它的材質(zhì)通常分為玻璃燒結(jié)石英和不銹鋼，如果不慎堵塞會(huì)造成流動(dòng)相吸液不暢，因此必須進(jìn)行清洗，玻璃材質(zhì)的通常是用稀硝酸泡，而不銹鋼材質(zhì)的可以直接進(jìn)行超聲清洗。
4.流動(dòng)相的脫氣
流動(dòng)相使用的注意事項(xiàng)必須使用HPLC級(jí)或相當(dāng)于該級(jí)別的流動(dòng)相，并要先經(jīng)0.45µm薄膜過(guò)濾。過(guò)濾后的流動(dòng)相必須經(jīng)過(guò)充分脫氣，以除去其中溶解的氣體(如02)，如不脫氣易產(chǎn)生氣泡，增加基線噪聲，造成靈敏度下降，甚至無(wú)法分析。
實(shí)際工作中，超聲脫氣法操作簡(jiǎn)單，被廣泛應(yīng)用，雖然此方法有時(shí)會(huì)引起氣體溶解度的增加，但基本上能滿足日常分析操作的要求。
輸液泵的保養(yǎng)
輸液泵是液相色譜儀的心臟部件，品質(zhì)再好的泵，若不注意日常保養(yǎng)，其損壞的幾率是*的，將大大降低儀器的使用價(jià)值。
1.使用甲醇作流動(dòng)相，請(qǐng)注意自身保護(hù)和環(huán)境保護(hù)，廢液注入空瓶?jī)?nèi)，集中處理，不得倒入下水道內(nèi)。
2.輸液泵使用前，先注意探漏檢查，視各密封點(diǎn)和泵體有否漏液。
3.在無(wú)流動(dòng)相通入的情況下，嚴(yán)禁啟動(dòng)泵體電機(jī)，以免柱塞密封環(huán)磨損。
4.測(cè)試泵流量性能時(shí)，用于收集液體的容器，應(yīng)選用小口瓶頸的容器，防止收集過(guò)程中，溶液蒸發(fā)，影響測(cè)量精度。必要時(shí)應(yīng)將其密封存放在干燥容器內(nèi)，以預(yù)防光學(xué)系統(tǒng)霉變。
5.金屬泵體的輸液泵，應(yīng)盡量避免使用含有鹵離子(如KCL、NaCL、NH4CL)的流動(dòng)相或能產(chǎn)生鹵離子的流動(dòng)相，若必須使用此類流動(dòng)相，建議使用泵體用非金屬材料制造的輸液泵。方則使用后，應(yīng)立即使用去離子水清洗泵體和整個(gè)色譜系統(tǒng)的管路。
6.使用的流動(dòng)相必須是HPLC級(jí)或分析純級(jí)，特別是配置的流動(dòng)相，在使用前，必須過(guò)濾掉其中的顆粒狀雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45μm的濾膜過(guò)濾)。
7.長(zhǎng)期不使用輸液泵，應(yīng)在后分析結(jié)束時(shí)，用注射器吸取去離子水通過(guò)的泵頭清洗孔清洗泵體和柱塞桿。以延長(zhǎng)密封圈和寶石柱塞桿的壽命。
8.輸液泵液路在維修或保養(yǎng)時(shí)，應(yīng)切斷儀器電源。非專業(yè)維修人員請(qǐng)不要打開(kāi)機(jī)箱罩。
除此之外，在泵的使用過(guò)程中，常常會(huì)遇到更換流動(dòng)相的情況，這種更換是指從反相溶劑更換到正相溶劑或者反過(guò)來(lái)的過(guò)程。這個(gè)過(guò)程要考慮流動(dòng)相的兼容性，常用的正反相色譜溶劑是不互溶的，所以在更換期間，一定要用異丙醇*沖洗系統(tǒng)，保證管路里所有的原有溶劑都被異丙醇替換掉后再更換流動(dòng)相。
三、進(jìn)樣器的保養(yǎng)
1.防止交叉污染
自動(dòng)進(jìn)樣器常見(jiàn)的問(wèn)題是交叉污染，交叉污染產(chǎn)生的原因很直接，樣品殘留在進(jìn)樣針內(nèi)外表面，并隨下一次進(jìn)樣進(jìn)入色譜系統(tǒng)。要解決交叉污染，主要靠清洗。自動(dòng)進(jìn)樣器都會(huì)有洗針的功能，如果樣品濃度較高或者是吸附性比較強(qiáng)，一定要打開(kāi)此功能；如果未打開(kāi)洗針功能，污染可能已經(jīng)殘留在了針座或流通閥上，那么這兩個(gè)部件需及時(shí)超聲清洗。
2.峰面積重現(xiàn)性差處理
出現(xiàn)在自動(dòng)進(jìn)樣器上的另外一個(gè)問(wèn)題是峰面積重現(xiàn)性差，考慮可能與自動(dòng)進(jìn)樣器吸取樣品有關(guān)。首先觀察樣品的液面是不是足夠高，以保證進(jìn)樣器可以吸到樣品。排除這個(gè)問(wèn)題后，再察看自動(dòng)進(jìn)樣器的設(shè)置，對(duì)于一些粘度大的樣品，要降低自動(dòng)進(jìn)樣器的吸取速度。
四、色譜柱的保養(yǎng)
色譜柱不能夠碰撞、彎曲或強(qiáng)烈振蕩。安裝時(shí)要保證閥件或管路的清潔。流動(dòng)相在使用前必須進(jìn)行脫氣處理，盡量不使用或少使用高粘度的流動(dòng)相。在滿足靈敏度的情況下，盡可能使用小進(jìn)樣量。如果樣品比較“臟”，要進(jìn)行凈化或提純處理。分析結(jié)束后，要清洗進(jìn)樣閥中殘留的樣品，并用流動(dòng)相或適當(dāng)?shù)娜軇┣逑瓷V柱。色譜柱常期不使用時(shí)，除了進(jìn)行清洗處理外，還必須在其中充入該柱規(guī)定的貯藏液(甲醇、去離子水等)后再密封保存，重新啟用時(shí)，應(yīng)用流動(dòng)相沖洗數(shù)分鐘后，再接入檢測(cè)器，以免貯藏液進(jìn)入流通池。
注意事項(xiàng)
液相色譜柱的種類繁多，不同的分析對(duì)象，應(yīng)選用不同的分離柱、流動(dòng)相和操作波長(zhǎng)。
在實(shí)際應(yīng)用中用戶可參閱專業(yè)液相色譜儀文獻(xiàn)和書(shū)籍中介紹的內(nèi)容結(jié)合本儀器的特點(diǎn)，選擇的分析條件，以達(dá)到您的分析目的。
五、檢測(cè)器的保養(yǎng)
紫外檢測(cè)器是液相色譜儀應(yīng)用廣泛的檢測(cè)器，紫外檢測(cè)器要保持檢測(cè)器中的流通池清潔，每天用后注意沖洗真整個(gè)管路。要定期用強(qiáng)溶劑反向沖洗流通池(斷開(kāi)柱)，以清洗流通池。流動(dòng)相要脫氣，防止氣泡滯留在流通池內(nèi)，影響分析效果。注意氘燈的保養(yǎng)，及時(shí)更換。
